“小草从土里探出头来,伸伸懒腰,看见春天已经来了,连忙整理发型。花骨朵也探出头来,春风告诉它春天到了。”花卉是人们生活很好的伙伴,花以她独特的魅力让很多人投身花卉种植。很多同道中人都会交流花卉的种植经验,我想你遇到问题时希望有人来帮助吧?为此,鲜之花网小编从网络上为大家精心整理了《条纹十二卷的组织培养和快速繁殖》,欢迎您参考,希望对您有所助益!

条纹十二卷(Haworthia fasciata)是百合科十二卷属的植物,原产南非开普省。是极具观赏价值的小型植物,色彩淡雅 ,是大众化的多肉植物。由于以往主要通过分株法来繁殖,繁殖系数低。组织培养法是快速繁殖十二卷属植物的有效途径。另外,据文献记载十二卷属植物大都使用花序作为外植体,我们主要采用幼芽和嫩叶作外植体。

1.材料与方法:
1.1材料 条纹十二卷茎根部幼芽

1.2培养条件 以MS为基本培养基。
启动培养和诱导愈伤组织培养基: A:MS+6BA 3mg/l(下同)+VitaminC 200
芽分化及增殖培养基: B:MS+6BA 3+NAA 0.2+Vc200 C:MS+6BA 2+NAA 0.2+Vc200
根分化及增殖培养基: D:MS+2,4-D 1
复壮与生根培养基: E:MS+NAA 1
以上培养基均含蔗糖3%,琼脂7‰, pH=6.0.
培养温度 25±1℃ ,光照 8h/d , 光强度 2000lx.

1.3培养方法
从盆栽条纹十二卷母株茎根部切取生有4-5片幼叶的腋芽。流水冲洗5min,0.2%新洁尔
灭 浸泡30min,流水冲洗10min(这种方法比较节约水源,且污染率很低)。将材料至于超净台上用 0.1%HgCl2消毒8min,无菌水冲洗10次,无菌滤纸吸干水份。用解剖刀切取芽部分,并将切下的幼叶分 割成 0.5cm2 的小块儿。接种到培养基A中培养。

2.实验结果:
2.1 芽培养
条纹十二卷的芽在培养及A上迅速膨大并生长,大约20d后,将伸长的芽切割成3-4部分
, 接种于培养基B中。再过一星期在各芽基部都有一团幼芽萌生(约5-10个)。

2.2愈伤组织及芽诱导
幼叶截段经在A中培养约2个星期后,伤口表面有一层无色透明的愈伤组织产生。该愈伤组织经20天的培养并不见增殖而是从上面长出2-3个小芽,将芽切下转入B中后形成一团小苗。

2.3根诱导及其转化
将幼叶截段放入D中培养一个月,在伤口处形成许多白色球状根系并不断增多。将这些
根转入A中培养约一星期,根系转绿并有愈伤组织生出,在转入C中二星期后有球状胚体产生,有些 胚体开始长出幼叶。

2.4继代增殖与快速繁殖
将上述得到的小苗丛或球状胚粗略分割,接于C中即可大量增殖,平均每两周增殖一倍。目前,我们 所用的一个芽作外殖体,两个月后已经得到20多瓶继代植株(每瓶约30株左右)。

2.5壮苗生根 将大苗接种于培养基E中,加强光照到10h/d,一星期后生根,再培养约一星期便可移栽。

2.6移栽 在出瓶前打开瓶口,炼苗两天。将有根的苗洗去培养基移于蛭石+珍珠岩的无菌基质中,保持湿度,成活率高于90%.

(本文在中国科学院植物研究所、中国植物学会主办,第2001-5期《植物杂志》上发表。编辑:林月惠。)

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条纹十二卷扦插繁殖方法


时间

条纹十二卷在秋季、冬季都可以进行扦插繁殖,秋冬季节生长比较明显,到了夏天生长停滞,进入休眠期。

插穗

条纹十二卷在开花后,花序节间会长出不定芽,可以直接剪取做插穗,也可以用顶芽做插穗。把顶芽从植株的上半部分5-8厘米处剥离,可以促使新芽的萌发。摘下来的顶芽一定要等到伤口干燥以后才能进行扦插。

繁殖

等到插穗伤口干燥后,可以直接种植在小盆中,不需要做特别的保湿处理,在生长初期要放置在光线明亮处,等到盆土干燥后再浇水。盆土的介质要用排水良好的配方,可以在三合一的介质中加入唐山石,等到根部再生后,把植株放到光线充足处养殖。

条纹十二卷怎么度夏


条纹十二卷的度夏温度

其实,十二卷比我们想象的耐高温,只要温度不超过42℃就可以正常生长。

当然能温差对条纹十二卷的生长叶很重要,10℃以上的温差对于它而言是十分必要的,否则在高温小温差的环境中生长会很慢的,并且容易烂根死亡。

条纹十二卷的度夏光照

条纹十二卷虽光照十分敏感,所以夏季遮光才是重点。北方养殖,40%遮光,叶片会呈现红褐色,生长缓慢甚至停止,65%遮光生长正常,并且叶色嫩绿。80%以上遮光植株迅速生长,有拔高的趋势。

所以说,只要夏季温度不超过35℃,只要不是全黑的环境,遮阴得当,条纹十二卷会迅速生长。

条纹十二卷度夏要通风

夏季,通风队条纹十二卷时分重要,在夏季就算在遮阴的环境下,花盆也会白晒得法人,充分的通风和适当的洒水可以带走一部分的热量,起到降低环境温度的作用。

在阴雨天及时通风还可以带走潮气,防止夏季病虫害的发生。

条纹十二卷度夏浇水要求

浇水对于十二卷度夏而言至关重要,夏季要保证条纹十二卷正常生长及时浇水是必要的。夏季水分蒸发量大,一旦花盆干透对对根部的伤害是很大的。最简单的方法就是在空盆中装进土壤,放在同一环境中观察,看几天干透。这样可以大体估计一下浇水时间,大家可以试一下。

条纹十二卷度夏注意事项

条纹十二卷夏季不要换盆,不要进行砍头繁殖。

在度夏期间可能对出现叶子干尖的情况,只属于正常的,主要通风,按照上述的养护方法基本不会出什么问题。

条纹十二卷授粉方法


选取植株

首先,你要选择授粉的植株,即两个开花的不同品种的十二卷,什么品种自己定就好。

仔细看一下条纹十二卷的花,一共有六个花瓣组成,从外观上很难看得到它的雄蕊与雌蕊。

授粉准备

在授粉之前还需要一个步骤,为了方便获得花粉,需要将花托长的品种进行处理一下。就是把花托往下拉,拉成下图这样就可以了,花托并不长的就可以不用处理。这样将花粉露在外面,操作就方便许多。

分辨雄雌蕊

仔细看,雄蕊的排列形式原来和十二卷的花瓣一样,数量是6,当中的一枚稍微有点膨大的就是雌蕊。雌蕊的顶上白色的突起是柱头,待会儿我们就要把花粉涂抹到这个地方上

取下雄蕊

将两个植株的雄蕊摘下,找个东西固定一下,不过要分清品种。

授粉

接着,拿镊子把另外一棵花上面的花粉涂抹到这棵花的雌蕊上面,动作要小,力度要轻,千万不要一出手就把雌蕊柱头给捅掉了。剩下的时间就是慢慢等待。

授粉成功

授粉成功的雌蕊会慢慢发育成果实,颜色变深,微微开始膨大,而且不但没有干枯的迹象,反而会觉得一天比一天大。

再过几天,更大了,而且颜色变的更深,果实变得更长。

注意:在种荚变成褐色之前用胶带粘住,这样做的目的是防止在种荚成熟干燥后弹射出种子。如果种荚头部开裂成“三瓣嘴”即表示种子成熟了。摘下后里面黑乎乎的种子就可以立即播种,种子寿命不长不宜长期保存,一年之后几乎不能萌发。

竹节秋海棠组织培养及快速繁殖


竹节秋海棠是秋海棠科秋海棠属的一种多年生常绿草本花卉,其花朵繁多,花色娇艳,花期特长(4——6个月),又较耐阴,适于栽培观赏,深受养花人的喜爱。但竹节秋海棠分株能力弱,茎段扦插成活率低,繁殖速度慢,性状易变异,无法满足市场需要。本文探讨的叶、叶柄、茎段为外植体的组培快繁技术,操作不受季节限制。通过组织培养,直接培育成再生植株,繁殖速度快,繁殖系数高,遗传性状稳定。并在壮苗生根阶段首次尝试用液培,效果甚是理想。液培苗粗壮,根系发达,移栽更易成活。出瓶、生根不易伤根,免受污染,洗苗、洗瓶也都更省工。我室出瓶移栽的竹节海棠苗,经半年种植,已正常开花。这为竹节秋海棠的快速繁殖提供了一条可靠而有效的途径,同时对其他植物的快速繁殖也可能有一定参考价值。现将竹节秋海棠组培快繁技术介绍如下:

一、植物名称

竹节秋海棠(B.President-carnot)

二、材料类别

叶片、叶柄、茎段

三、培养条件

以MS为基本培养基。诱导愈伤组织培养基:(1)MS+BA3——5mg/L(单位下同)+NAA0.1——0.5。丛生芽增殖培养基。(2)MS+BA1.0+NAA0.1。(3)MS十BA0.5十NAA0.1。(4)壮苗培养基:1/2MS(液体)。(5)诱导生根培养基:1/2MS +NAA0.2。上述培养基均加3.0%蔗糖、0.8%琼脂,pH值5.8。培养温度(24±2)℃,光照不宜过强,有80Olx左右即可,光照10h/d。

四、生长与分化情况

(一)无菌材料获得 将竹节秋海棠已平展之幼嫩叶片、叶柄、茎段先用适量洗衣粉对水洗涤,然后用自来水反复冲洗,于无菌条件下用75%酒精药棉擦拭干净,放于饱和漂白粉溶液10分钟,后置于0.1%升汞溶液中消毒2分钟,用无菌水冲洗5——6次,消毒滤纸吸收干表面水分,叶片切成0.5cm见方小块,叶柄、茎段则切成约长1cm左右长条,均接种于培养基(1)上。

(二)丛芽的诱导与增殖 接种、培养1周后,叶、叶柄、茎段周围开始膨大、增厚,质地变硬,逐渐形式黄绿色愈伤组织,3周后渐渐分化出小芽点,芽点继续生长,约5周左右形成明显的丛生芽。将丛生芽切成小块,接种于(2)和(3)培养基上进行增殖,小芽丛上不断分化出很多幼芽。叶、叶柄、茎段在两个培养基上增殖速率基本相同,约4周左右继代1次,增殖系数可达6——9。

(三)壮苗 在进行大量增殖阶段后,我们停止固体培养而改为液培,将分化芽转接到1/2MS,3周后,可发现生长健壮、个体粗壮的无根苗。这为以后生根、移苗出瓶,提高适应外界环境,增强抗病能力,提供了良好条件,移栽更易成活。

(四)根的诱导 将高约3cm、生长健硕的无根壮苗,接种到培养基(5)上。2周后,苗基部长出辐射状白色小根,每株生根5——7条,3周后,根伸长至1.0——1.5cm,生根率达100%。

(五)试管苗的移栽 将培养有试管苗的三角瓶盖打开,在实验室通风处炼苗3d,取出小苗,洗去根部残留培养基,种植前根部在0.2%Na2SO4溶液中滞留片刻。移栽到用高压灭菌消毒过的蛭石+细沙+园土(1:1:1)的混合基质中,地上部喷施0.1%多菌灵溶液,用薄膜覆盖,每天喷水2次,1周后揭膜,成活率在95%以上。

条纹十二卷怎么出锦


什么是出锦

出锦指的是在养殖过程中,因为外界环境的改变,如受到温差、光照、水分的影响,叶片的颜色会发生变化,和动物界的白化类似。

但多肉出锦并不是病态,只是植株的另一种表现形式。

条纹十二卷出锦好吗?

一般来说,条纹十二卷出锦,叶片会出现黄色条纹,就会被称为“锦”,如兰花的锦叶艺,非常漂亮。

条纹十二卷出锦并不会影响它的生长,只不过是换了一种形态生长。喜欢多变的不妨试一下在几种养出两种条纹十二卷。

怎么让条纹十二卷出锦

条纹十二卷的出锦方式,一个是人工干预,另一个就是自然出锦,普通的家庭还达不到那么高的技术水平,只能让它自然出锦。只要在养护过程中稍加注意,出锦是没有问题的。

想让条纹十二卷出锦,在养护中要严格控制环境:

十二卷喜温暖干燥的环境,耐干旱,怕积水。强光照射会使叶尖变红,甚至枯焦。相反,光照不足又会使株形散乱,影响观赏。

所以要放在光线明亮又无直射阳光处养护。平时保持盆土偏干一些,以控制长势,维持盆景的完美;

春、秋季节每月施一次薄肥,夏季注意通风,冬季节制浇水,5℃以上即可安全过冬。

冬季则需要充足的光照条件,光线不足易造成叶片退化、缩小,严重影响正常的生长。

条纹十二卷会开花吗


条纹十二卷会开花吗

条纹十二卷是会开花的,花序从叶腋间抽生,花梗笔直而细长,花朵小巧,为蓝紫色,花尊筒状,花瓣向外翻,花托较长。

条纹十二卷在春末夏初开花。条纹十二卷植株矮小,无明显的地上茎,叶片布满白色条纹,非常可爱喜人。

条纹十二卷开花怎么养

条纹十二卷在春秋两季就会开花了,不需要喷药催花,自然状态下养护就会开花。

养殖盆土要用颗粒土为主,加少量泥炭土放上缓释肥就可以了,不耐寒也怕高温避免暴晒,切忌盆土长时间的潮湿。

开花后,浇水的话见干则浇,浇则浇透,低于10度就会休眠,最低不可低于5度。开花之后尽量放到室外养护,保持通风。

在开花期间,发现植株生长瘦弱,可以追施磷钾肥或者将花箭剪掉,以免开花消耗过多的养分,影响植株之后的生长。不过,你需要知道,条纹十二卷开花并不会死,只是在开花之后植株因为消耗了大部分的养分,生长瘦弱。不需要担心,及时补充养分,慢慢就会恢复了。

条纹十二卷的播种方法


条纹十二卷的播种准备:选种

都说条纹十二卷的种子保存期很短,其实还好,只不过从市面上买回的种子怎么才能知道是好是坏呢?

如果有条件,建议自己种自己采收,找朋友要点种子也是可以的!

或者大家到正规的种子店购买,不要图便宜在路边买,通常种子的质量都不咋地。

想要检查种子的质量,回来用水一泡就知道。

条纹十二卷的播种方法

首先准备好一张旧报纸铺在育苗盆的底部。

然后在报纸上谱土,买回简单的多肉土壤,加点蛭石,然后放点杀虫剂就好了。

上面再铺一层小颗粒的石子,大概5mm左右,然后整盆浸水。

噔噔噔噔,种子,可以在水里泡一下,将干瘪的种子筛选一下,或者直接播种。

播种之后盖上玻璃,放在阳光下开始漫长的闷发过程。

半个月之后,就会稀稀拉拉的长出许多小嫩苗。

条纹十二卷的叶插方法


选叶

健康的叶子就行,砍头后或者移栽的时候,顺手掰下来的叶子。尽量保证叶片的完整性。叶片卸下之后,要经过干燥和灭菌处理,一定要放在阴凉处晾一下。

土壤选择

赤玉\鹿沼\兰石都可以,蛭石\珍珠岩也可以,甚至市场上卖的多肉专用土也可。若条件允许,可以采用上下层为大颗粒赤玉土,层为小颗粒赤玉+蛭石+稻壳碳。

时间选择

条纹十二卷扦插一般会在春秋两季进行,因为此时的气候条件比较适宜它的生长,细胞活跃,代谢比较快,是叶插最容易成活的季节。其次冬季也可以,保证温度适宜,不过相对出苗的时间要长。

养护

选择好时间、土壤叶片都已经准备就绪,直接将叶片平放在土壤中即可。重点在于怎么管理。

一星期浇一次透水,每天喷一次水,保证足够的湿度。若家中有小温室更好,保证最够的湿度,叶片直接扔到土面上,自己就会生根的,如果没有,那就勤快点多浇水。

当叶片长出小根后,把根埋进土里,多浇点水,过不了过不了多久,就会长芽的。

出苗时间

这个没有固定的时间,就算是同一个品种也会有差异。

出苗时间从一周到几个月不等,最长的还有9个月的,只要叶子没有萎蔫,化水,就一定要耐心等待。

条纹十二卷的养殖方法(示例)


“簇簇鲜艳的花朵,聚集在叶片下,犹如无数只蝴蝶,微微张开翅膀,停在空中,凝然不动。”古往今来,很多人都在赞美花,赏花种花可以令我们的生活增色不少。花卉种植实际上学问很多,怎么样才可以种植好花草呢?请您阅读花卉网小编辑为您编辑整理的《条纹十二卷的养殖方法(示例)》,仅供您在种植花草参考。

条纹十二卷是一种十分可爱的小型多浆植物,它翠绿的叶片上有许多白色的星星点点,再加上整体植株不是很大,可以配上一些可爱的花盆来装饰窗台、书桌等地,下面花儿谷就来给大家介绍一下这种条纹十二卷的养殖方法。

一、肥水

一般而言,这种多肉多浆植物的抗旱能力都非常强,但我们在日常养护的过程中千万不要忽视浇水和施肥的作用,浇水要贯彻不干不浇、浇则浇透的原则,也可以选择在施肥后的第二天浇水,促进肥料的吸收,但千万不可形成积水,否则容易导致烂根。

二、温度

条纹十二卷生长最适宜的温度为15~32℃,怕高温,夏季酷暑超过33℃会进入休眠期。冬季的温度最好控制在10℃以上,如果温度低于7℃,条纹十二卷就会进入休眠状态,如果低于5℃,则有可能导致植物冻伤死亡。

三、光照

条纹十二卷的主要生长季节在春秋两季,此时要给予它足够量的光照,光合作用可以促进养分的积累。到了夏季温度和光照强度都非常大,此时最好把植物放在半荫出养护,如果要放在室外就要适当遮荫,通常遮荫50%为好,这样养出来的叶色会很好看。而冬季则要放在明亮的室内养护,注意控制温度,经常转动花盆的方向,使植株受光均匀。

四、湿度

一般我们花儿谷为大家介绍养殖方法时很少提到湿度,其实湿度也是影响植物生长的一个因素,比如喷水就能提高植物周围空气的湿度。条纹十二卷喜欢相对干燥的环境,连绵阴雨天很容易感染病虫害,因此尽量少让条纹十二卷淋雨,也不要在晚上给它洒水,保持干燥即可。

以上就是条纹十二卷的养殖方法,大家看了图片后有没有被这种植物萌到呢,如果喜欢的话就快快买上一盆来种吧。

条纹十二卷的养殖方法和注意事项


肥水要求

条纹十二卷的耐旱能力很强,在干旱的环境下也可很好的生长,但这并不等于不需要浇水和施肥。因为根系怕水渍,如果盆内积水或者水肥过多,容易烂根。

所以浇水施肥要坚持:间干间湿,干要干透,不干不浇,干透浇透。

施肥后第二天浇水,促进肥效的吸收。浇灌肥水的时候避免将植株弄湿。

温度要求

条纹十二卷生长最适宜的温度为15~32℃,怕高温,夏季酷暑超过33℃会进入休眠期。

越冬温度要控制在10℃以上,冬季气温若降到7℃一下会进入休眠状态,如果环境接近4℃,植株会冻伤死亡。

光照要求

春秋两季,温度不是很高,条纹十二卷正处于生长季节,可以能给与直接的阳光照射,光合作用可以促进养分的积累。

夏季,要将植株放在半阴处养护,或放在室外遮阴50%,叶色会更加漂亮。

冬季,放在明亮的室内养护,注意控制温度,经常转动花盆的方向,使植株受光均匀。

湿度要求

条纹十二卷喜欢相对干燥的环境,连绵阴雨天很容易感染病虫害。

怕雨淋,室外养护的植株要做好遮挡,晚上不要忘叶片上洒水,保持叶片干燥。

最适宜的空气湿度为40~60%,湿度不够时,通过洒水、喷水加湿。

繁殖方法

分株法,可以结合换盆进行。全年均可进行,常在4-5月换盆时,把母株周围的幼株剥下,直接盆栽。分株上盆后将盆置于荫蔽处,并控制浇水,待新根长出后逐渐增加光照和浇水量。盆土宜选用2份腐叶土与1份河沙的混合土,另外加入适量骨粉或过磷酸钙作基肥。每年春季秋为旺盛生长期,浇水要适量,以盆土偏干为宜,过多容易引起根部腐烂,此时需肥量较大,一般每3周浇施1次复合肥;夏季为休眠期,控制浇水,注意适当遮荫;冬季温度维持在10℃以上,浇水量以盆土干燥为宜,温度低,浇水量大,会导致叶片萎蔫,植株死亡。

扦插:5-6月将肉质叶片轻轻切下,基部带上半木质化部分,插于沙床,约20-25天可生根。根长2-3厘米时可盆栽。

养殖注意事项

放在室内养殖的条纹十二卷,尽量将其放在东南方向的门窗附近,这样便于它接受阳光,并且每半个月或者一个月,将其搬到室外养殖一段时间,长期在室内即使阳光充足,叶片也会变薄,新枝条和叶柄纤细。

条纹十二卷的根系十分敏感,怕水渍,如果花盆内积水,或者浇水施肥过于频繁,很容易烂根,所以浇水要控制好。

条纹十二卷进入休眠期的时候,要控制号水肥,在浇水时,尽量选择晴天中午温度比较高的时候进行。

组织培养技术


植物组织培养即植物无菌培养技术,是根据植物细胞具有全能性的理论,利用植物体离体的器官、组织或细胞,如根、茎、叶、花、果实、种子、胚、胚珠、子房、花药、花粉以及贮藏器官的薄壁组织、维管束组织等,在无菌和适宜的人工培养基及光照、温度等条件下,能诱导出愈伤组织、不定芽、不定根,最后形成完整的植株。至今,世界各国在无性系繁殖、花卉育种、植株脱病毒和种质保存等方面,广泛应用组织培养技术。

(一)组织培养技求的应用

1.无性系繁殖无性系繁殖是植物组织培养应用的主流之一,用植物组织培养进行无性繁殖的优点是,用材少,速度快,不受气候、季节、基质等自然条件的影响,比传统的常规繁殖方法要快得多,人们又叫它"快速繁殖"或"微型繁殖"。其常见繁殖方式有短枝扦插、芽增殖、原球茎、器官分化和胚状体发生。其中芽增殖在盆栽花卉繁殖中应用最为普遍,如草本植物四季秋海棠、鸡冠花、万寿菊、长春花,观叶植物蟆叶秋海棠、网纹草、花叶芋、天鹅绒竹芋,木本植物三角花、比利时杜鹃、月季、八仙花等,在生产实践中,均已取得较好的经济效益。原球茎培养在大花蕙兰、蝴蝶兰、美丽兜兰、石斛、春兰等兰科植物和肾蕨、凤尾蕨、鹿角蕨等观赏蕨的规模性生产中得到广泛应用。胚状体培养,据报道目前已在30个科150种植物上观察到它们的愈伤组织可以分化出胚状体,而盆栽花卉中的花叶芋、山茶花都是成功的范例。器官分化主要是从外植体直接产生不定芽或不定根,一般不通过从愈伤组织进行器官分化形成植株,因为其性状有可能发生变化或经过多次继代培养后,会丧失再生植株的能力。

2.花卉育种当今盆栽花卉育种中,也广泛应用组培技术。

胚培养:在花卉种间杂交或远缘杂交中,有时虽然能正常受精,但胚往往发育不完全或胚与胚乳间不亲和,不能得到种子,可采用胚的早期离体培养促使胚正常发育,培养出杂交后代。如山茶花、百合和鸢尾杂交中均采用幼胚培养,成功地收到了杂交种子。同时,在杂交中受精困难,也可把未受精的胚珠分离出来,在试管内用花粉受精来解决,这在草本花卉花菱草中已取得成功。

单倍体育种:利用花药培养诱导花粉形成单倍体,在试管培养中通过秋水仙素处理,使染色体加倍,而成为纯合二倍体植物,从而缩短新品种育种的时间,还有利于突变中隐性突变的分离。这在花卉的株型、花色、花型的大小或重瓣,叶型、叶色等产生变异,往往有直接利用价值。这在矮牵牛的育种中已应用。

体细胞杂交和植物基因工程:利用原生质体遗传操作技术,可以从原来不大可能进行杂交的不同属植物间获得体细胞杂种或核质杂种。可以通过摄取外源目的基因,定向改造植物的某些重要性状。

3.植株脱病毒用无性繁殖方法来繁衍的花卉种类如菊花、香石竹、郁金香、百合、白鹤芋等,不能通过种子途径去除病毒,用化学方法防治和高温处理往往成效不稳定。作为组织培养的无性繁殖材料,最好是去病毒组织,否则易导致病毒积累,危害加重。而植物的茎尖部分无维管束,病毒难以侵入。所以,茎尖培养是获得无病毒植株的最好途径。至今,茎尖培养脱毒法已在菊花、百合、香石竹、郁金香等盆栽花卉上推广使用。

4.种质保存用无性繁殖的植物,因没有种子,只能在植物园内长期栽培保存,耗费大量的土地和劳力。种质材料还易受自然环境的变化和病虫危害而流失。若用组织培养方法,保存愈伤组织、胚状体、茎尖等组织,可节省大量人力和物力。

(二)组织培养的几个步骤

1.材料的选用一般用于组织培养的材料称为外植体。常分为两类。一类是带芽的外植体,如茎尖、侧芽、鳞芽、原球茎等,组织培养过程中可直接诱导丛生芽的产生。其获得再生植株的成功率较高,变异性也较小,易保持材料的优良性状。另一类主要是根、茎、叶等营养器官和花药、花瓣、花轴、花萼、胚珠、果实等生殖器官。这一类外植体需要一个脱分化过程,经过愈伤组织阶段,再分化出芽或产生胚状体,然后形成再生植株。

外植体的取用与组织部位、植株年龄、取材季节以及植株的生理状态、质量,都对培养时器官的分化有一定影响。一般阶段发育年幼的实生苗比发育年龄老的栽培品种容易分化,顶芽比腋芽容易分化,萌动的芽比休眠芽容易分化。在组织培养中,最常用的外植体是茎尖,通常切块在0.5厘米左右,太小产生愈伤组织的能力差,太大则在培养瓶中占据空间太多。培养脱毒种苗,常用茎尖分生组织部,长度为0.1毫米以下。

2.外植体的消毒植物组培能否取得成功的重要因素之一,就是保证培养物在无菌条件下安全生长。为此,必须抓好外植体的消毒和实行无菌操作。

由于培养的植物材料大都采集于田间栽培植株,材料上常附有各种微生物,一旦被带入培养基,即会迅速繁殖滋长,造成污染,培养失败。所以培养前必须对外植体进行严格的消毒处理,消毒的尺度为既能全都杀灭外植体上附带的微生物,但又不伤害材料的生活力。因此,必须正确选择消毒剂和使用的浓度、处理时间及程序。目前,常用的消毒剂有次氯酸钙、氯化汞、次氯酸钠、双氧水、酒精(70%)等。具体消毒方法如下:

(1)茎尖、茎、叶片的消毒消毒前先用清水漂洗干净或用软毛刷将尘埃刷除,茸毛较多的用皂液洗涤,然后再用清水洗去皂液,洗后用吸水纸吸干表面水分,用70%酒精浸数秒钟,取出后及时用10%次氯酸钙饱和上清液浸泡10~20分钟。或用2%~10%次氯酸钠溶液浸泡6~15分钟。消毒后用无菌水冲洗3次,用无菌纱布或无菌纸吸干接种。

(2)根、块茎、鳞茎的消毒这类材料大都生长在土中,常带有泥土,挖取时易遭损伤。消毒前必须先用净水清洗干净,在凹凸不平处以及鳞片缝隙处,均用毛笔或软刷将污物清除干净,用吸水纸吸干后,在70%酒精中浸一下,然后用6%~10%次氯酸钠溶液浸5~15分钟,或用0.1%~0.2%氯化汞消毒5~10分钟,最后用无菌水清洗3~4次,用无菌纱布或无菌纸吸干后接种。

(3)果实、种子的消毒这类材料有的表皮上具有茸毛或蜡质,消毒前先用70%酒精浸泡几秒钟或2~10分钟,然后用饱和漂白粉上清液消毒10~30分钟或2%次氯酸钠溶液浸10~20分钟,消毒后去除果皮,取出内部组织或种子接种。直接用种子或果实消毒,经消毒后的材料均须用无菌水多次冲洗后接种。

(4)花药、花粉的消毒植物的花药外面常被花瓣、花萼包裹着,一般处于无菌状态,只需采用表面消毒即可接种。通常先用70%酒精棉球擦拭花蕾或叶鞘,然后将花蕾剥出,在饱和漂白粉上清液中浸泡10~15分钟,用无菌水冲洗2~3次,吸干后即可接种。

3.组织培养的条件接种后的培养容器置放培养室,室温应控制在23~26℃,每天12~16小时光照,光照度为1000~3000勒克斯。

4.外植体的增殖接种后的外植体要分化出丛状芽、愈伤组织或胚状体,必须对培养基及激素的种类和浓度进行严格的设计和筛选。常用的基本培养基为MS培养基,激素的种类和浓度对外植体的分化和增殖起到重要的作用。也就是说不同的花卉种类对激素的种类和浓度是有差别的(表4--3)。

5.诱导生根继代培养形成的不定芽和侧芽等一般没有根,要促使试管苗生根,必须转移到生根培养基上,生根培养基一般应用1/2MS培养基,因为降低无机盐浓度有利于根的分化。同时,不同盆栽花卉诱导生根时所需要的生长素的种类和浓度是不同的(表4-4)。一般常用吲哚乙酸(IAA)、萘乙酸(NAA)和吲哚丁酸(IBA)三种。一般在生根培养基中培养1个月左右即可获得健壮根系。

6.组培苗的移栽生根或形成根原基的试管苗从无菌,温、光、湿度稳定环境中进入到自然环境中,从异养过渡到自养过程,必须经过一个炼苗过程。首先打开试管瓶塞放阳光充足处让其锻炼1~2天,然后取出幼苗用温水将琼脂冲洗掉,移栽到泥炭、珍珠岩、蛭石、砻糠灰等组成的基质中,基质使用前需高温消毒,移栽后要适当遮荫,可用塑料薄膜覆盖,保持较高空气湿度,温度维持在25℃左右,勿使阳光直晒,7~10天后要注意通风和补充浇水,约20~40天,新梢开始生长后,小苗可转入正常管理。

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